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體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則

一、適用范圍

體外診斷試劑臨床試驗是指在相應的臨床環(huán)境中，對體外診斷試劑的臨床性能進行的系統(tǒng)性研究。臨床試驗的目的在于證明體外診斷試劑能夠滿足預期用途要求，并確定產(chǎn)品的適用人群及適應證。臨床試驗結(jié)果為體外診斷試劑安全有效性的確認和風險受益分析提供有效的科學證據(jù)。

體外診斷試劑通過體外檢測人體樣本提供檢測結(jié)果，用于單獨或與其他信息共同輔助判斷受試者的目標狀態(tài)（健康狀態(tài)、疾病狀態(tài)、疾病進程或其他可用于指導臨床處置的疾病/健康狀態(tài)等）。體外診斷試劑的“臨床性能”即指體外診斷試劑由預期使用者在預期使用環(huán)境中使用，針對目標人群獲得與受試者目標狀態(tài)相關(guān)的檢測結(jié)果的能力。

本指導原則適用于按照醫(yī)療器械管理的體外診斷試劑在中國境內(nèi)進行的、用于中國境內(nèi)注冊申請的臨床試驗。

本指導原則旨在明確臨床試驗的基本原則和臨床試驗中需要考慮的關(guān)鍵因素，并對臨床試驗質(zhì)量管理提出基本要求，用于指導申辦者的臨床試驗工作，也為技術(shù)審評部門對臨床試驗資料的審評提供參考。

由于體外診斷試劑產(chǎn)品具有發(fā)展快、專業(yè)跨度大、臨床預期用途各異的特點，不同產(chǎn)品的臨床試驗方法及內(nèi)容不盡相同。申辦者應根據(jù)產(chǎn)品具體情況，制定合理的臨床試驗方案，本指導原則內(nèi)容也將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時修訂。

二、基本原則

（一）倫理原則

臨床試驗應當遵循《世界醫(yī)學大會赫爾辛基宣言》的倫理準則和國家涉及人的生物醫(yī)學研究倫理的相關(guān)要求，應當經(jīng)倫理委員會審查并同意。

研究者需考慮臨床試驗用樣本，如血液、尿液、痰液、腦脊液、糞便、陰道分泌物、鼻咽拭子、組織切片、骨髓、羊水等的獲得和試驗結(jié)果對受試者的風險，提請倫理委員會審查，確保臨床試驗不會將受試者置于不合理的風險之中，并按要求獲得受試者（或其監(jiān)護人）的知情同意。

（二）科學原則

臨床試驗的開展應建立在臨床前研究的基礎(chǔ)上，具有充分的科學依據(jù)和明確的試驗目的。應根據(jù)產(chǎn)品預期用途、相關(guān)疾病的流行病學背景和統(tǒng)計學要求等，對臨床試驗進行科學的設(shè)計，同時最大限度控制試驗誤差、提高試驗質(zhì)量，對試驗結(jié)果進行科學合理的分析。在保證試驗結(jié)果科學、準確、可信的同時，盡可能做到高效、快速、經(jīng)濟。

（三）依法原則

本指導原則是在《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》（國務(wù)院令第739號）、《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）和《醫(yī)療器械臨床試驗質(zhì)量管理規(guī)范》的法規(guī)框架下制定的。體外診斷試劑臨床試驗的開展應符合相關(guān)法規(guī)、規(guī)章的要求。

1. 臨床試驗機構(gòu)和人員

體外診斷試劑臨床試驗應當在具備相應條件且按照規(guī)定備案的醫(yī)療器械臨床試驗機構(gòu)開展。

體外診斷試劑臨床試驗應按照同一臨床試驗方案在多家臨床試驗機構(gòu)開展。申辦者負責選擇、確定體外診斷試劑臨床試驗的協(xié)調(diào)研究者，協(xié)調(diào)研究者供職的醫(yī)療機構(gòu)為組長單位。協(xié)調(diào)研究者承擔臨床試驗中各中心的協(xié)調(diào)工作。

組長單位倫理委員會負責審查試驗方案的倫理性和科學性，參加試驗的其他臨床試驗機構(gòu)倫理委員會在接受牽頭單位倫理委員會審查意見的前提下，審查該項試驗在本臨床試驗機構(gòu)的可行性，包括研究者的資格與經(jīng)驗、設(shè)備與條件等，一般情況下不再對試驗方案設(shè)計提出修改意見，但是有權(quán)不批準在其臨床試驗機構(gòu)進行試驗。

體外診斷試劑臨床試驗機構(gòu)應當具備臨床試驗所需的專業(yè)技術(shù)水平、組織管理能力，并能夠開展倫理審查工作，具有與所開展臨床試驗相適應的人員、設(shè)施和條件等。具體包括但不限于：常規(guī)開展相關(guān)檢測項目和/或疾病診療項目，具有相關(guān)診斷結(jié)果解讀和疾病處置的能力，具有防范和處理臨床試驗中突發(fā)事件和嚴重不良事件的應急機制和處置能力；具有能夠滿足臨床試驗需要的受試人群；具有必備的實驗室檢測條件，滿足相關(guān)的檢測實驗室資質(zhì)認定要求（如有）等。臨床試驗機構(gòu)應能夠確保臨床試驗嚴格按照方案實施，并能夠配合產(chǎn)品注冊申報過程，包括進行必要的補充試驗、配合申辦者組織的監(jiān)查和稽查，以及藥品監(jiān)督管理部門、衛(wèi)生健康管理部門開展的檢查等。

臨床試驗主要研究者應具有設(shè)計并實施相關(guān)臨床試驗的能力、具有試驗體外診斷試劑臨床試驗所要求的專業(yè)知識和經(jīng)驗，應熟悉相關(guān)的臨床試驗法規(guī)要求。參與臨床試驗的人員經(jīng)培訓后應熟悉相關(guān)檢測技術(shù)的原理、適用范圍、操作方法等，并能夠?qū)z測結(jié)果進行正確判讀。臨床試驗統(tǒng)計學負責人應為具有相關(guān)專業(yè)背景、專業(yè)能力的人員。

2. 臨床試驗方案和報告

2.1臨床試驗方案

開展體外診斷試劑臨床試驗，申辦者應根據(jù)試驗目的，綜合考慮試驗體外診斷試劑的預期用途、產(chǎn)品特征和預期風險等，組織制定科學、合理的臨床試驗方案。臨床試驗方案經(jīng)倫理委員會批準后應在臨床試驗全過程中嚴格遵循。

各臨床試驗機構(gòu)應執(zhí)行同一臨床試驗方案，方案中對試驗設(shè)計類型、對比方法選擇、受試者選擇、評價指標、統(tǒng)計分析方法、樣本量估算和質(zhì)量控制要求等做出明確的規(guī)定，并根據(jù)各機構(gòu)情況合理確定樣本量分配計劃。

有關(guān)臨床試驗方案內(nèi)容的具體要求參見《醫(yī)療器械臨床試驗質(zhì)量管理規(guī)范》及其附件體外診斷試劑臨床試驗方案范本。

2.2臨床試驗小結(jié)與報告

臨床試驗結(jié)束后應分別總結(jié)各臨床試驗機構(gòu)的臨床試驗數(shù)據(jù)，出具臨床試驗小結(jié)，并附臨床試驗數(shù)據(jù)表、臨床試驗中所采用的其他試驗方法或其他體外診斷試劑等產(chǎn)品的基本信息等資料。臨床試驗小結(jié)正文應包括如下內(nèi)容：

2.2.1臨床試驗概述（試驗體外診斷試劑信息、試驗流程圖、對比方法信息、其他相關(guān)檢測方法/試劑信息、受試者入組情況、樣本采集和保存、檢測儀器、納入統(tǒng)計的樣本量、樣本剔除情況說明、試驗數(shù)據(jù)的總結(jié)和描述性分析等）；

2.2.2執(zhí)行方案的版本號及版本日期，臨床試驗人員信息，試驗開始時間和結(jié)束時間；

2.2.3臨床試驗質(zhì)量管理情況，包括：臨床試驗前培訓、臨床試驗過程質(zhì)控、偏倚的控制措施、記錄管理、數(shù)據(jù)管理、樣本、試劑和儀器管理情況等；

2.2.4臨床試驗倫理情況的說明；

2.2.5不良事件和器械缺陷的發(fā)生以及處理情況；

2.2.6方案偏離、方案修改情況說明；

2.2.7 其他。

臨床試驗數(shù)據(jù)表內(nèi)容至少包括：唯一可追溯的樣本編號、人口學信息（性別、年齡）、受試者臨床診斷背景信息、樣本類型、檢測結(jié)果等。需要時附臨床試驗原始圖譜等。

臨床試驗數(shù)據(jù)表應由臨床試驗操作者、復核者簽字，臨床試驗機構(gòu)簽章（封面章和騎縫章）。

申辦者、協(xié)調(diào)研究者對所有臨床試驗數(shù)據(jù)進行匯總和統(tǒng)計分析后，完成臨床試驗報告。有關(guān)臨床試驗報告內(nèi)容的具體要求參見《醫(yī)療器械臨床試驗質(zhì)量管理規(guī)范》及其附件體外診斷試劑臨床試驗報告范本。

2.3臨床試驗方案、臨床試驗小結(jié)應當由主要研究者簽名、注明日期，經(jīng)醫(yī)療器械臨床試驗機構(gòu)審核簽章后交申辦者。臨床試驗報告應當由協(xié)調(diào)研究者簽名、注明日期，經(jīng)組長單位醫(yī)療器械臨床試驗機構(gòu)審核簽章后交申辦者。臨床試驗所有資料均應由申辦者簽章。

三、臨床試驗設(shè)計

體外診斷試劑臨床試驗設(shè)計與產(chǎn)品預期用途、適應證、適用人群（目標人群）、被測物特點、檢測樣本類型、產(chǎn)品使用方法（如使用者）和檢測結(jié)果報告方式（如定性、定量）等直接相關(guān)。臨床試驗結(jié)論應能夠證明產(chǎn)品的臨床性能滿足預期用途的要求，并支持說明書中所描述的相關(guān)內(nèi)容。

根據(jù)產(chǎn)品特點和產(chǎn)品性能評價需要，體外診斷試劑臨床試驗可能包括不同的臨床試驗目的，有必要針對各個臨床試驗目的，分別進行科學的臨床試驗設(shè)計，包括選擇適當?shù)呐R床試驗設(shè)計類型，確定適合的對比方法、受試者入組/排除標準和臨床評價指標等，并進行科學的樣本量估算。

同時，臨床試驗是根據(jù)抽樣得到的有限的受試者樣本得出研究結(jié)果，對未來具有類似情況的受試者總體（目標人群）做出統(tǒng)計學推斷的過程。因此在臨床試驗設(shè)計時，需要根據(jù)統(tǒng)計學原理，對試驗相關(guān)因素作出合理、有效的安排，并對試驗結(jié)果進行科學合理的分析。

對于全新的體外診斷試劑或相比已上市同類產(chǎn)品有重大差異的產(chǎn)品，在正式開展臨床試驗之前，可考慮設(shè)計一個小樣本的探索性試驗。探索性試驗的開展有助于減少非預期的結(jié)果導致臨床試驗中需要改變關(guān)鍵設(shè)計的可能性。一般而言，為了做出科學上有效的確證推理，探索性試驗數(shù)據(jù)不應與臨床試驗階段的研究數(shù)據(jù)合并。本文不針對探索性試驗的設(shè)計和管理提出具體要求，但探索性試驗實施過程中可借鑒本文相關(guān)內(nèi)容。

（一）設(shè)計類型

根據(jù)在臨床試驗過程中試驗體外診斷試劑檢測結(jié)果對受試者的影響，體外診斷試劑臨床試驗主要包括兩種設(shè)計類型：觀察性研究和干預性研究。

觀察性研究中，采用試驗體外診斷試劑對樣本進行檢測的同時，受試者還會接受常規(guī)臨床診斷和實驗室檢測，試驗體外診斷試劑檢測結(jié)果不用于患者的管理，不影響臨床決策；臨床試驗中通過評價該檢測結(jié)果與確定受試者目標狀態(tài)的臨床參考標準（或其他方法）判定結(jié)果的一致性，確認產(chǎn)品臨床性能。

干預性研究中，試驗體外診斷試劑檢測結(jié)果將用于患者管理或指導治療，通過評價治療效果或患者受益，為支持體外診斷試劑安全有效性的判定提供證據(jù)。

臨床試驗設(shè)計時應根據(jù)體外診斷試劑的特點和預期用途，選擇適當?shù)脑O(shè)計類型。

本指導原則的內(nèi)容主要基于觀察性研究設(shè)計進行討論并提出要求，其他臨床試驗設(shè)計的情形可依據(jù)具體的情況參照執(zhí)行。

1. 觀察性研究中的橫斷面研究和縱向研究

一般的，體外診斷試劑的觀察性研究主要涉及橫斷面研究，即評價單一時間點采集樣本的檢測結(jié)果與臨床參考標準（或其他方法）判定結(jié)果的一致性。除此以外，有些產(chǎn)品需要進行縱向數(shù)據(jù)研究，即需要多個時間點采集樣本的檢測結(jié)果才能評價產(chǎn)品臨床性能。例如，某些用于治療監(jiān)測的體外診斷試劑，在臨床試驗中應對受試者及其樣本中的被測物進行治療前后多個時間點的觀測，以證明被測物檢測結(jié)果的變化與病情發(fā)展、治療效果的相關(guān)性。臨床試驗方案中應根據(jù)被測物特點、疾病進程等明確受試者觀測時間、臨床評價指標等。

2. 觀察性研究中對比方法的選擇

一般情形下，觀察性研究中，采用試驗體外診斷試劑與臨床參考標準進行比較研究，評價試驗體外診斷試劑檢測結(jié)果與受試者目標狀態(tài)的相關(guān)性，臨床評價指標一般包括臨床靈敏度和臨床特異度等。臨床參考標準是指現(xiàn)有條件下臨床上可獲得的能夠用來確定受試者目標狀態(tài)的最佳方法，通常來自臨床和實驗室的醫(yī)學實踐，包括：現(xiàn)有條件下公認的、可靠的、權(quán)威的疾病診斷標準（如組織病理學檢查、影像學檢查、病原體分離培養(yǎng)鑒定、長期隨訪所得的結(jié)論等），疾病診療指南中明確的疾病診斷方法，行業(yè)內(nèi)專家共識推薦的或臨床上公認的、合理的參考方法等。臨床參考標準可能是一種方法，也可能是多種方法相結(jié)合。

對于境內(nèi)已有同類產(chǎn)品上市的體外診斷試劑，臨床試驗亦可采用試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品（對比試劑）進行比較研究的方法，評價兩種方法檢測結(jié)果的一致性，評價指標通常包括陽性符合率、陰性符合率等。對比試劑在預期用途、適用人群、樣本類型、檢測方法學、檢測性能等方面應與試驗體外診斷試劑具有較好的可比性。

為了更加全面地評價體外診斷試劑的臨床性能，臨床試驗中有時需要將與臨床參考標準的比較研究和與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品的比較研究相結(jié)合，對產(chǎn)品的臨床性能進行綜合評價，從而支持有關(guān)預期用途的所有聲稱內(nèi)容。

對于目前臨床上不存在或無法獲得適當?shù)呐R床參考標準、或臨床參考標準尚不能全面評價產(chǎn)品臨床性能，同時境內(nèi)亦無同類產(chǎn)品上市的情況，設(shè)計臨床試驗方案時，應在證明產(chǎn)品臨床意義的同時，依據(jù)現(xiàn)有臨床實踐和理論基礎(chǔ)，選擇目前公認、合理的方法，進行比較研究，進一步確認產(chǎn)品臨床性能。

臨床試驗對比方法的選擇應根據(jù)產(chǎn)品預期用途、樣本類型、檢測結(jié)果報告方式以及臨床參考標準和對比試劑的可獲得性等因素進行綜合考慮，臨床試驗結(jié)論應能夠支持預期用途聲稱的內(nèi)容。臨床試驗方案中應描述對比方法的選擇依據(jù)。

體外診斷試劑變更注冊的臨床試驗可采用變更后產(chǎn)品與變更前產(chǎn)品進行比較研究；對于變更前后產(chǎn)品性能發(fā)生顯著變化或增加臨床適應證等情形，亦可采用變更后產(chǎn)品與臨床參考標準或境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品進行比較研究，證明變更后產(chǎn)品的臨床性能符合要求。

3. 觀察性研究中的特殊情形

對于某些體外診斷試劑，臨床試驗設(shè)計中可能遇到需要特殊考慮的情形，例如：某些情況下，試驗體外診斷試劑與對比試劑由于樣本采集、處理、保存等差異導致不能使用同一份樣本進行檢測（例如：適用樣本為拭子樣本，但兩種方法適用的拭子材質(zhì)和保存液不同的情況），此時可針對每位受試者進行兩次樣本采集，并分別進行試驗體外診斷試劑和對比試劑的檢測，兩次采集樣本的順序應遵循隨機原則。需要注意的是，一般僅在一次樣本采集不會影響下一次樣本采集時才考慮采用此種試驗方法。

（二）受試者選擇和樣本收集

臨床試驗方案中應根據(jù)試驗體外診斷試劑的預期用途、目標人群和檢測要求等合理確定臨床試驗受試者入組/排除標準、受試者分層入組要求和樣本收集方法等。

1. 臨床試驗的受試人群

臨床試驗受試者應來自產(chǎn)品預期用途所聲稱的適用人群（目標人群），如具有某種癥狀、體征、生理、病理狀態(tài)或某種流行病學背景等情況的人。非目標人群入組可能引入受試者選擇偏倚，導致臨床試驗結(jié)果不能反映產(chǎn)品的真實情況。

受試人群應能夠代表目標人群的特征，包括人口學特征（性別、年齡）、癥狀、體征、合并癥以及疾病的階段、部位和嚴重程度等；同時受試者應排除不適合該臨床試驗的生理或病理特征。

根據(jù)以上要求合理設(shè)定受試者入組/排除標準，并在臨床試驗過程中采取適當?shù)拇胧┐_保只有符合該標準的人方能入組。

此外，受試者入組還需根據(jù)產(chǎn)品特點考慮其他可能的影響因素，如不同民族、不同種族、不同地域的影響等。

舉例來說，用于疾病輔助診斷、鑒別診斷的產(chǎn)品，受試者應來自具有疑似癥狀或有相關(guān)流行病學背景的人，包括具有目標疾病狀態(tài)的受試者和不具有目標疾病狀態(tài)的受試者。具有目標疾病狀態(tài)的受試者應能夠盡量覆蓋疾病狀態(tài)的全部特征，包括癥狀典型和非典型、疾病的分型、分期、病程的長短、病情的輕重等，以評價產(chǎn)品的臨床靈敏度；不具有目標疾病狀態(tài)的受試者需包括具有相同或相似的癥狀、易與目標疾病狀態(tài)相混淆的其他疾病病例等，以評價產(chǎn)品的臨床特異度；此外還應考慮納入可能對檢測產(chǎn)生干擾的樣本等。

2. 受試者分層入組

當體外診斷試劑臨床性能預期在不同亞組的人群中有差異，且對某些重要亞組的臨床性能需得到準確評價時，建議采用分層入組的方式，且亞組的樣本量應滿足統(tǒng)計學要求。

分層入組是將目標人群劃分為預先指定的非重疊的不同亞組，針對每個亞組分別入組受試者。例如，根據(jù)需要按性別（男性、女性）和年齡組（低于或高于特定年齡）對目標人群進行分層。分層入組方式不僅確保了對重要亞組的充分評價，還有利于獲得更準確的性能結(jié)果。

3. 樣本收集

體外診斷試劑臨床試驗中應按照臨床試驗方案規(guī)定的入組/排除標準、受試者招募方式、樣本采集方式等規(guī)定進行受試者入組并采集樣本。

特定情況下，某些受試者樣本可以來自既往的、其他研究的樣本集或無特定用途的樣本集。此種情形下則需特別注意避免引入偏倚，例如：①試驗過程中，經(jīng)過編盲后，試驗操作者和結(jié)果判讀者應不能區(qū)分來自既往樣本集的樣本；②既往樣本集樣本其儲存、處理等應符合要求；③既往樣本集樣本的納入可能導致具有罕見狀況的受試者在臨床試驗受試人群中的比例顯著高于在自然狀態(tài)下目標人群總體中的比例，這個潛在偏倚應在統(tǒng)計分析中加以考慮。

如果既往樣本納入較多，需格外注意充分論證可能的選擇偏倚等問題，例如：①受試人群是否能夠代表目標人群的各種特征（而不僅僅是最典型的特征）；②樣本是否來自足夠大的樣本集從而在一定程度上實現(xiàn)抽樣的隨機性要求；樣本集中的樣本是否存在非隨機的樣本剔除；③樣本是否具有充分的受試者臨床信息；④定量檢測的臨床試驗中，樣本是否能夠覆蓋整個線性范圍；⑤樣本是否為產(chǎn)品適用的樣本類型，且保存條件和時間滿足被測物穩(wěn)定性要求等。

（三）臨床試驗機構(gòu)數(shù)量和要求

1. 臨床試驗機構(gòu)數(shù)量

對于需要進行臨床試驗的體外診斷試劑，第二類產(chǎn)品應選擇不少于2家（含2家）符合要求的臨床試驗機構(gòu)、第三類或新研制產(chǎn)品應選擇不少于3家（含3家）符合要求的臨床試驗機構(gòu)開展臨床試驗。需進行變更注冊臨床試驗的，一般可選擇不少于2家（含2家）符合要求的臨床試驗機構(gòu)開展臨床試驗。

2. 臨床試驗機構(gòu)要求

申辦者應根據(jù)產(chǎn)品特點及其預期用途，綜合不同地區(qū)人群差異、流行病學背景、病原微生物的特性等因素選擇具有代表性的機構(gòu)開展臨床試驗，包括受試人群的代表性、臨床條件（預期使用環(huán)境和使用者）的代表性等。

3. 中心效應

整個臨床試驗過程應嚴格按照倫理委員會同意的臨床試驗方案、有關(guān)標準操作規(guī)程等文件開展，其中試驗操作、結(jié)果判讀等應與體外診斷試劑產(chǎn)品說明書中的相關(guān)規(guī)定一致；臨床試驗開始前，申辦者應當負責組織與該臨床試驗相關(guān)的培訓，包括試驗體外診斷試劑的儲存、操作、管理等，以確保臨床試驗操作的一致性，最大限度地控制試驗誤差；試驗實施過程中要有必要的監(jiān)查及質(zhì)控措施；各臨床試驗機構(gòu)之間試驗樣本量應盡量均衡；應當考慮各家臨床機構(gòu)開展臨床試驗的時間不同可能帶來的影響，盡量同期開展臨床試驗。

應該注意，盡管使用了同一研究方案，各臨床試驗機構(gòu)的臨床數(shù)據(jù)進行合并統(tǒng)計時，仍有可能出現(xiàn)中心效應，即各中心試驗結(jié)果出現(xiàn)顯著差異。中心效應可能反映了各中心之間受試人群、臨床試驗操作等方面的差異，中心效應的產(chǎn)生可能影響研究結(jié)果的解釋。臨床試驗方案設(shè)計時應考慮如何避免由于中心效應所帶來的潛在偏倚。

（四）臨床評價指標

臨床評價指標應在臨床試驗的設(shè)計階段確定，并在臨床試驗方案中予以明確。

定性檢測的體外診斷試劑臨床試驗評價指標通常包括診斷準確性（靈敏度、特異度、預測值、似然比、ROC曲線下面積等）或檢測一致性（陽性/陰性符合率、總符合率、Kappa值等）。

半定量檢測的體外診斷試劑臨床試驗評價指標通常包括：各等級符合率、陰/陽性符合率及Kappa值等。

定量檢測的體外診斷試劑臨床試驗評價指標通常包括回歸分析的回歸系數(shù)、截距、相關(guān)系數(shù)和決定系數(shù)等。

（五）臨床試驗的統(tǒng)計學分析

臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計分析應建立在正確、完整的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上，選擇適當?shù)呐R床評價指標來評價體外診斷試劑的臨床性能，并采用適當?shù)慕y(tǒng)計模型對數(shù)據(jù)進行分析。

1. 統(tǒng)計學分析的基本考慮

體外診斷試劑的統(tǒng)計分析一般包括評價指標的參數(shù)估計（含置信區(qū)間估計）和假設(shè)檢驗。參數(shù)估計是在保證評價指標滿足期望精度水平（置信區(qū)間的寬度一定）的前提下，確認靈敏度、特異度、（回歸方程的）回歸系數(shù)和截距等評價指標的水平。假設(shè)檢驗則需對統(tǒng)計學指標提出無效假設(shè)及備擇假設(shè)，通過假設(shè)檢驗進行相關(guān)統(tǒng)計學推斷。如有必要，需在統(tǒng)計分析之前考慮對樣本的分布假設(shè)進行驗證，從而合理選擇統(tǒng)計方法。

對于有確定的臨床可接受標準的研究，應在臨床試驗方案中明確接受標準，并經(jīng)過臨床試驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學分析證明臨床評價指標的評價結(jié)果（區(qū)間估計）滿足可接受標準要求。臨床可接受標準應為行業(yè)廣泛認可的結(jié)果，一般依據(jù)相關(guān)檢測試劑的性能水平、風險判定和臨床需求等因素進行設(shè)定。

1.1定性檢測的統(tǒng)計學分析

定性檢測臨床試驗一般以2×2表的形式總結(jié)兩種分析方法的檢測結(jié)果，并據(jù)此計算靈敏度（陽性符合率）、特異度（陰性符合率）、總符合率、Kappa值等指標及其置信區(qū)間。

除此之外，還可同時進行假設(shè)檢驗評價兩種分析方法的一致性。

1.2半定量檢測的統(tǒng)計學分析

半定量檢測的體外診斷試劑通常是指：檢測結(jié)果報告為幾個等級值（例如：陰性、+、2+、3+）、或者報告為終點稀釋度的試劑等。臨床試驗可采用R×C表形式總結(jié)檢測結(jié)果，并據(jù)此計算各等級的符合率、陰/陽性符合率及Kappa值等指標及其置信區(qū)間。

1.3定量檢測的統(tǒng)計學分析

1.3.1應根據(jù)臨床試驗數(shù)據(jù)繪制散點圖，并進行相關(guān)性分析。

1.3.2采用Bland-Altman法，計算一致性限度，評價兩種檢測結(jié)果的一致性。一致性限度應在臨床所能接受的界值范圍內(nèi)。

1.3.3采用回歸分析對兩種檢測方法的一致性進行評價。應根據(jù)數(shù)據(jù)分布特點等因素選擇適用的回歸分析方法，如Passing-Bablok回歸、Deming回歸和最小二乘回歸等?；貧w分析應重點觀察回歸方程的回歸系數(shù)和截距等指標，計算回歸系數(shù)和截距的置信區(qū)間。亦可同時對相關(guān)評價指標進行假設(shè)檢驗。

1.3.4應特別針對醫(yī)學決定水平附近的檢測結(jié)果進行分析。

1.4ROC分析

對于試驗體外診斷試劑檢測結(jié)果為定量或半定量數(shù)據(jù)，臨床參考標準判斷結(jié)果為定性結(jié)果的統(tǒng)計學分析，也可采用受試者工作特征（ROC）曲線的方法，以ROC曲線下面積反映試驗體外診斷試劑檢測的診斷價值，或同時比較兩種試劑的診斷價值。對于體外診斷試劑的臨床試驗，采用ROC分析方式進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計時仍應進一步以推薦的陽性判斷值進行靈敏度、特異度等指標（及其置信區(qū)間）的評價。

2. 定性檢測的不一致樣本分析

在定性檢測試劑臨床試驗中，如有試驗體外診斷試劑與對比方法檢測結(jié)果不一致的情況，應對不一致結(jié)果進行綜合分析，說明是否影響對產(chǎn)品臨床性能的判定；對檢測結(jié)果不一致的樣本可采用臨床參考標準或其他恰當?shù)姆椒ㄟM行分析，但該分析結(jié)果不應納入原有統(tǒng)計分析。

3. 如有必要，應對獲得的數(shù)據(jù)集進行分層、分段統(tǒng)計。

4. 納入臨床試驗的樣本不應隨意剔除，應在臨床試驗方案中設(shè)定樣本剔除標準；如有任何剔除，應在臨床試驗小結(jié)和報告中詳細列出所有樣本剔除的情形，并說明理由。

5. 在體外診斷試劑臨床試驗的全過程中，生物統(tǒng)計學分析的結(jié)論非常重要，同時也要充分考慮到臨床診療對于體外診斷試劑臨床性能的要求；在產(chǎn)品安全有效性的評價中，應綜合考慮評價結(jié)果的統(tǒng)計學意義及其所代表的臨床意義。

（六）樣本量要求

適當?shù)臉颖玖渴潜ＷC體外診斷試劑臨床性能得到準確評價的必要條件。體外診斷試劑臨床試驗的樣本量與多種因素相關(guān)，包括評價指標、檢測的可重復性、干擾因素、亞組間的差異性、以及被測物特點等。臨床試驗方案中應對臨床試驗需要的最低樣本量進行估算，并說明依據(jù)。

1. 關(guān)于樣本量要求的基本考慮

1.1臨床試驗樣本量應滿足統(tǒng)計學要求，應采用適當?shù)慕y(tǒng)計學方法進行估算。

1.2臨床試驗樣本量的確定應考慮臨床性能的各種影響因素，保證對臨床性能的充分評價，如：受試人群應能夠代表目標人群的各種特征，考慮到不同亞組中檢測性能的評價需要，以及多種被測物（或多種亞型等）檢測性能評價的要求，應在估算最低總樣本量的基礎(chǔ)上，保證各種組別/類型樣本的例數(shù)滿足要求。當體外診斷試劑臨床性能預期在不同亞組的人群中有差異，且對某些重要亞組的臨床性能需得到準確評價時，應對亞組樣本量單獨進行統(tǒng)計學估算。

1.3如果試驗體外診斷試劑適用于不同的樣本類型，則還需考慮不同樣本類型的樣本量要求。

采用不同樣本類型檢測相同被測物時，可能因其樣本基質(zhì)差異、被測物來源差異、被測物濃度水平差異、干擾因素差異以及采樣部位差異等因素導致產(chǎn)品分析性能、臨床性能以及適用人群、適應證、參考區(qū)間等方面的差異。針對不同樣本類型應考慮上述差異造成的影響，確定合理的樣本量要求。

如不同樣本類型在臨床性能、適用人群、適應證、參考區(qū)間等方面存在顯著差異，需針對不同的樣本類型分別進行臨床試驗設(shè)計，包括分別進行樣本量估算和統(tǒng)計學分析。

如通過臨床前研究證明不同樣本類型之間存在分析性能差異，但不對臨床性能造成顯著影響，例如某些免疫學檢測中的血清與全血樣本，則臨床試驗中應以一種樣本類型為主進行臨床試驗，樣本例數(shù)滿足統(tǒng)計學要求；其他樣本類型適當納入一定數(shù)量陽性和陰性樣本，通過同源樣本對比試驗或與對比方法的比較研究進行臨床性能的評價。

如不同樣本類型在樣本基質(zhì)、被測物來源、被測物濃度水平、干擾因素以及采樣部位等方面幾乎沒有差異，且經(jīng)臨床前研究證明分析性能沒有差異，例如某些檢測中的血清和血漿樣本，則臨床試驗中不同樣本類型可進行匯總統(tǒng)計。

1.4如果臨床試驗包含不同的臨床試驗目的，則需分別進行臨床試驗設(shè)計，包括分別進行相應的樣本量估算。例如：臨床試驗目的包括：①評價試驗體外診斷試劑與對比試劑的檢測一致性研究；②評價試驗體外診斷試劑用于疾病鑒別診斷的靈敏度和特異度，則針對上述兩個臨床試驗目的，應分別進行臨床試驗設(shè)計，并估算最低樣本量。

1.5對于定量檢測試劑，在線性范圍內(nèi)的各個濃度水平均應有一定量的樣本例數(shù)，并著重考慮對醫(yī)學決定水平的檢測性能進行充分驗證；對于定性檢測試劑，臨床試驗樣本則應包含一定數(shù)量的陽性判斷值附近樣本（如涉及）。

2. 采用統(tǒng)計學方法進行樣本量估算

采用統(tǒng)計學公式進行樣本量估算的相關(guān)要素一般包括評價指標的預期值、評價指標的可接受標準（如適用）、Ⅰ類和Ⅱ類錯誤概率以及預期的受試者脫落剔除率等。

應在方案中明確用于樣本量估算的評價指標。評價指標的預期值根據(jù)已有臨床數(shù)據(jù)（基于目標人群樣本）、小樣本探索性試驗（如有）的結(jié)果或其他適當?shù)脑u價數(shù)據(jù)來設(shè)定，應在臨床試驗方案中明確這些參數(shù)的確定依據(jù)。

一般情況下，Ⅰ類錯誤概率α設(shè)定為雙側(cè)0.05或單側(cè)0.025，Ⅱ類錯誤概率β設(shè)定為不大于0.2。

本文附件中舉例說明幾種常見的樣本量估算方法，供參考。

3. 應注意，樣本量估算僅僅是基于統(tǒng)計學要求的最低樣本量估計，臨床試驗樣本量應以臨床性能得到充分評價為目標，保證目標人群的各種特征均有充分數(shù)量的代表性受試者入組，從而使臨床試驗結(jié)果全面、真實地反映目標人群的情況。

（七）偏倚的控制

偏倚是指在臨床試驗方案設(shè)計、實施及結(jié)果分析時，有關(guān)影響因素所致的系統(tǒng)誤差，致使對試驗體外診斷試劑安全有效性的評價偏離真值。偏倚干擾臨床試驗得出正確的結(jié)論，在臨床試驗的全過程中均需防范其發(fā)生。

1.盲法：體外診斷試劑的比較研究試驗中應對試驗體外診斷試劑和對比方法（如有）的試驗操作者和結(jié)果評價者設(shè)盲，使其在試驗過程中不知曉受試者的疾病診斷或其他相關(guān)檢測結(jié)果等信息，從而避免引入偏倚。

2.試驗體外診斷試劑檢測應與臨床參考標準的判斷或?qū)Ρ确椒z測盡量同步進行，以避免因疾病進程不同或樣本保存時間差異較大而造成臨床試驗結(jié)論偏離真值。

3.在臨床試驗機構(gòu)選擇、受試者選擇、試驗過程、統(tǒng)計學分析等各個階段均需進行偏倚的控制。例如：受試人群應盡可能代表目標人群的特征，以避免選擇偏倚；不同臨床試驗機構(gòu)在臨床試驗中應統(tǒng)一試驗操作和判讀標準等，以避免中心效應的發(fā)生。

（八）臨床試驗設(shè)計中還需考慮的其他因素

體外診斷試劑的一些固有特征可能影響臨床試驗設(shè)計中的關(guān)鍵要素，在進行臨床試驗設(shè)計時，應加以考慮，包括體外診斷試劑的檢驗原理、使用方法（包括對技能水平的要求等）、使用條件（使用者和使用環(huán)境）、使用中人為因素的影響等。

例如：

1.預期供消費者個人自行使用的體外診斷試劑，臨床試驗中，除需評價試驗體外診斷試劑臨床性能以外，還需評價無醫(yī)學背景的消費者對產(chǎn)品說明書的認知能力，并證明無醫(yī)學背景消費者與專業(yè)檢驗人員檢測結(jié)果的一致性。

2. 如果體外診斷試劑的檢測操作和數(shù)據(jù)處理、解讀等對使用者有專門的技能要求，則臨床試驗中對試驗人員的技能水平、培訓要求等應能夠代表該產(chǎn)品上市后對預期使用者的要求。

四、臨床試驗質(zhì)量管理

體外診斷試劑臨床試驗應符合《醫(yī)療器械臨床試驗質(zhì)量管理規(guī)范》的相關(guān)要求，維護臨床試驗過程中受試者權(quán)益和安全，保證臨床試驗過程規(guī)范，結(jié)果真實、準確、完整和可追溯。臨床試驗質(zhì)量管理應涵蓋臨床試驗的全過程，包括臨床試驗的方案設(shè)計、實施、監(jiān)查、稽查、檢查，數(shù)據(jù)的采集、記錄、保存、分析、總結(jié)和報告等。以下針對體外診斷試劑臨床試驗質(zhì)量管理中需要特別關(guān)注的問題進行說明：

（一）臨床試驗前管理

1.臨床試驗前，應確保產(chǎn)品設(shè)計已定型，完成試驗體外診斷試劑的分析性能評估、陽性判斷值或參考區(qū)間研究、質(zhì)量檢驗以及風險受益分析等，且結(jié)果應能夠支持該項臨床試驗。

2.臨床試驗中使用的試驗體外診斷試劑按照醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的相關(guān)要求生產(chǎn)且質(zhì)量合格。

（二）臨床試驗開展

各臨床試驗機構(gòu)原則上應當盡量同期開展臨床試驗，如在時間階段上有較大的差異，應有合理的解釋，確認采用了同一臨床試驗方案，并進行偏倚和中心效應分析。

（三）數(shù)據(jù)與記錄

1. 在臨床試驗中，主要研究者應當確保將任何觀察與發(fā)現(xiàn)均正確完整地予以記錄。臨床試驗的源數(shù)據(jù)至少應當包括：

1.1所使用的試劑和儀器的信息，包括名稱、規(guī)格/型號、批號/序列號、數(shù)量、接收日期、儲存條件、使用情況及剩余試劑的處理等。

1.2受試者篩選入選記錄、受試者基本信息（如性別、年齡、入組時間等）、臨床診療信息、樣本檢驗記錄以及不良事件等。

1.3臨床試驗用樣本來源、編號、保存、使用、留存、銷毀等各環(huán)節(jié)的完整記錄。

1.4 記錄者的簽名及日期。

2. 臨床試驗源數(shù)據(jù)不得隨意更改；確需作更改時應當說明理由，簽名并注明日期。

3. 樣本管理及溯源：臨床試驗樣本應由開展試驗的臨床試驗機構(gòu)提供，應具有唯一的可溯源編號，每一份樣本應可溯源至唯一受試者（如有特殊情況應在方案和報告中說明）。

4. 臨床試驗數(shù)據(jù)應具有可追溯性，臨床試驗報告、病例報告表、臨床試驗數(shù)據(jù)表等文件中的數(shù)據(jù)均應一致且可以追溯至源文件。

（四）臨床試驗所需試劑管理

臨床試驗中試驗體外診斷試劑、對比試劑及其配套使用的其他試劑（例如：核酸提取試劑等）和儀器、設(shè)備等的運輸、使用、儲存等，均應符合相關(guān)要求。

五、其他

1.對于特定的體外診斷試劑，具體的臨床試驗方法、統(tǒng)計方法、樣本量估算等可能有特定的要求，申辦者應根據(jù)具體情況進行科學的選擇和設(shè)計。如有相關(guān)產(chǎn)品的技術(shù)審查指導原則，應參考其中的相關(guān)要求。

2. 部分臨床試驗采用試驗體外診斷試劑與核酸序列測定、GC-MS/MS等實驗室檢測參考方法進行比較研究，而這些方法并非臨床常規(guī)檢測技術(shù)，需要專門的設(shè)備儀器和試驗條件，且大部分臨床試驗機構(gòu)不具備相關(guān)檢測條件。對于此類情況，申請人應盡可能選擇具備相應條件的臨床試驗機構(gòu)開展臨床試驗，確無檢測條件的部分臨床試驗機構(gòu)可將此部分測試委托給專門的測序機構(gòu)、或具備一定檢測資質(zhì)的實驗室進行檢測，并對檢測結(jié)果進行認可。產(chǎn)品注冊申報時應提交臨床試驗機構(gòu)與受委托機構(gòu)的委托證明文件、對比方法的方法學研究資料和質(zhì)控數(shù)據(jù)等。但不得委托申辦者的實驗室進行相關(guān)檢測。由申辦者直接委托的檢測結(jié)果不得作為臨床試驗數(shù)據(jù)提交。

附件：樣本量估算方法舉例

附件

樣本量估算方法舉例

申辦者應結(jié)合產(chǎn)品的具體特點、統(tǒng)計學分析模型等因素選擇適當?shù)臉颖玖抗浪惴椒?，并在方案中明確樣本量確定的依據(jù)。同時應充分考慮可能的脫落剔除率等情況，合理設(shè)定樣本量要求。

這里舉例說明幾種樣本量估算方法。

一、定性檢測的樣本量估算舉例

1.評價指標有確定的臨床可接受標準時，需證明產(chǎn)品評價指標滿足可接受標準要求。此時可采用單組目標值法樣本量公式估算最低樣本量。

公式中，n為樣本量；Z1-α/2、Z1-β為顯著性水平和把握度的標準正態(tài)分布的分數(shù)位，P0為評價指標的臨床可接受標準，PT為試驗體外診斷試劑評價指標預期值。

一般的，體外診斷試劑臨床試驗中，與已上市同類產(chǎn)品的對比試驗均可根據(jù)臨床需要設(shè)定適當?shù)呐R床可接受標準，并采用上述公式進行最低樣本量估算。

例：定性檢測試劑臨床試驗，采用試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品進行比較研究的方法，根據(jù)臨床需求，陽性、陰性符合率應分別達到85%和90%，根據(jù)探索性試驗結(jié)果，試驗體外診斷試劑與對比試劑陽性、陰性符合率預期分別可達到90%和94%。

陽性組（n+）和陰性組（n-）最低樣本量估計分別為：

根據(jù)以上估算，總樣本例數(shù)預計為750例。

按照脫落剔除率10%，則應至少入組834例受試者，實際入組受試人群中，陽性組和陰性組樣本例數(shù)應分別滿足上述n+和n-的最低要求。

應注意，臨床試驗樣本量除需滿足上述統(tǒng)計學估算的最低樣本量要求外，還應保證入組病例覆蓋受試者的各種特征；如涉及不同樣本類型，還需考慮不同樣本類型的例數(shù)要求等。

2.對于臨床試驗的參數(shù)估計中只保證評價指標滿足期望精度水平（置信區(qū)間的寬度一定），而不設(shè)定臨床可接受標準的情況，可采用如下公式：

公式中n為樣本量，Z1-α/2為置信度標準正態(tài)分布的分位數(shù)，P為評價指標預期值，Δ為P的允許誤差大小。

應注意，P和Δ的取值應有充分依據(jù)，除非有特殊理由，否則不建議設(shè)置Δ>0.05，當預期值更高時還應考慮更優(yōu)的精度。

采用上述公式，可根據(jù)靈敏度或特異度的預期值分別估算具有目標疾病狀態(tài)的受試者（陽性）或不具有目標疾病狀態(tài)的受試者（陰性）的樣本量。

例如：某項標志物檢測試劑用于相關(guān)疾病的輔助診斷，通過對已有資料進行分析得知，該檢測試劑的靈敏度預期為85%，特異度預期為90%，臨床試驗采用試驗體外診斷試劑與臨床參考標準進行比較研究的方法，評價試驗體外診斷試劑的臨床性能。允許誤差Δ取值0.05，則具有目標疾病狀態(tài)的受試者（陽性）最低樣本量（n+）估計為：

不具有目標疾病狀態(tài)的受試者（陰性）最低樣本量（n-）估計為：

根據(jù)以上估算，總樣本例數(shù)預計為334例。

按照脫落剔除率10%，則應至少入組371例受試者，實際入組受試人群中，具有目標疾病狀態(tài)的受試者（陽性）和不具有目標疾病狀態(tài)的受試者（陰性）樣本例數(shù)應分別滿足上述n+和n-的最低要求。

該臨床試驗中，除需滿足最低樣本量要求外，具有目標疾病狀態(tài)的受試者（陽性）還應確保覆蓋疾病的各種類型、不同疾病進程、不同疾病嚴重程度的病例；不具有目標疾病狀態(tài)的受試者（陰性）則需涵蓋臨床特異度評價所需的各種受試者樣本等。如果不同亞組人群預期靈敏度或特異度不同，還可能需要進行分層入組，并分別估算亞組樣本量。

3. 需要注意的是，當評價指標P接近100%時，上述兩種樣本量估算方法可能不適用，應考慮選擇更加適宜的方法進行樣本量估算和統(tǒng)計學分析，如精確概率法等。

二、定量檢測的樣本量估算

對于定量檢測，亦可針對適當?shù)脑u價指標，選擇適宜的統(tǒng)計學方法，進行樣本量估算。臨床試驗方案中建議同時給出與所選定評價指標對應的臨床可接受標準，并提供確定依據(jù)。